一、概述
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种:固相合成和液相多肽合成。
二、技术流程
多肽合成仪以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序(序列,一般从C端-羧基端 向 N端-氨基端)不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。固相合成法,大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生,参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的,并且在反应之前必须活化。固相合成方法有两种,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势,现在大多采用Fmoc法合成,但对于某些短肽,tBoc因其产率高的优势仍然被很多企业所采用。
具体合成由下列几个循环组成:
1) 去保护:Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂(piperidine)去 除氨基的保护基团。
2) 激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联,形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环:这两步反应反复循环直到合成完成。
3) 洗脱和脱保护:多肽从柱上洗脱下来,其保护基团被一种脱保护剂(TFA) 洗脱和脱保护。
三、客户须知
合成能力(Scale):mg~kg
纯度(Purity): 粗品~>99%
● 粗品脱盐—适用于筛选
● >75%—适用于免疫级别多肽
● >85%—适用于生化级别多肽
● >95%—高纯度多肽
● >98%—药用、临床等
多肽修饰服务:
● 化学修饰:荧光修饰(FITC、FAM、罗丹明等)、Biotin标记、甲基化、 乙酰化、酰胺化、脂肪酸(Pal,Myr等)、磷酸化修饰
● 环肽: 酰胺环、二硫键环
● 蛋白偶联(KLH,BSA,OVA)
● 含特殊氨基酸(D型、各种氨基酸衍生物)
● 原料药用多肽、
● 复合抗原多肽(MAP)
四、报告内容及标准
● 多肽产品含有真实有效的UPLC 、质谱检测报告。
● 多肽的质量。
五、收费标准及服务周期
收费标准及服务周期因根据客户提供的样品不同而有所改变,详细请跟客服专员联系或参考所签署的合作合同。
六、质量保证
● 博海所有多肽均为冻干粉状态,并用多肽专用管进行包装
● 签订多肽合成合同及保密协议(必要时)。
● 多肽生产周期为2-3周,短肽(<15肽)最短时间为1周。具体多肽生产时间均以具体序列为准
七、售后服务
本公司会不定期进行顾客回访,以提高我们的服务质量。本条款以所签订的合作合同为依归,详情会因合同内容的不同而有所差异。
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