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PCR

发表时间:2019-11-26 10:55:56 关注:

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大扩增特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 
一、概述

PCR是一种分子生物学技术,用于放大扩增特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。在进行表达载体的构建、目的蛋白质的表达等实验时,通常需要获得一段目的基因。我们可以根据您提供的已知参考序列 (NCBI上已发表),以基因组DNA或Total RNA为模板,获取您所需要的某个区域的一段基因。
      基因获取在研究原始材料中基因性状方面的独特优势,是合成基因所不能替代的。此外利用PCR技术还可实现目的基因的定点突变等。

二、技术流程

引物设计与合成

基因组DNA/Total RNA的提取

以基因组DNA为模板通过PCR扩增得到目的基因或以Total RNA为模板通过RT-PCR扩增得到目的基因

根据客户需要还可以完成以下服务:

1. 目的基因PCR产物的纯化及测序

2. 目的基因的克隆及测序

3. 目的基因亚克隆至表达载体中

三、客户须知

寄送给我们的实验材料必须保证新鲜

基因组DNA/Total RNA无明显降解,总量≥5 μg。基因组DNA浓度≥10 ng/μl,Total RNA浓度≥200 ng/μl。如果基因丰度较低或调取的基因较长,请您提供尽量多的材料。

如需克隆客户还需提供目的载体信息;客户自己构建的质粒必须提供测序结果;目标DNA片段序列及两端酶切位点;非常用限制性内切酶由客户自己提供,或我们帮忙订货,费用客户自理,剩余产品返回。

四、报告内容及标准

1. 实验报告(包括试验方法、PCR产物照片等)、电子版结果 (包括实验报告、测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图、酶切位点图等) 、引物等。

2. 若需要克隆,提供含有目的基因的质粒及穿刺菌。

五、收费标准及服务周期

收费标准及服务周期因根据客户提供的样品不同而有所改变,详细请跟客服专员联系或参考所签署的合作合同。

六、质量保证

1. 由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因,我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。
2. 由于某些基因在克隆载体或表达载体中会有表达,而表达产物会抑制宿主菌生长。因此,我们不保证所有的基因都能够成功进行克隆或者亚克隆。

七、售后服务

本公司会不定期进行顾客回访,以提高我们的服务质量。本条款以所签订的合作合同为依据,详情会因合同内容的不同而有所差异。


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